Observationsmetoder i mikroskopi

Brightfield-observation är den enklaste mikroskopitekniken. I detta system passerar ljus genom eller reflekteras av provet, utan någon förändring, utöver det som orsakas av själva provet.

Allt ljus från provet och omgivningen samlas in av linsen för att bilda en bild mot en helt ljus bakgrund. Denna typ av observationer är den mest lämpliga för färgade prover eller med naturliga pigment och som är mycket kontrasterade.

Det används allmänt inom patologi och växt- och djurhistologi, för observation av fina vävnadssektioner, det kontrasterade provet visas under en ljus bakgrund. Det är emellertid inte för användbart för observation av levande celler.

Darkfield-observationsmetoden är en kontrastteknik, utan direkt ljus, där endast ljus som avviker från provet används för att bilda bilden.

Vid denna teknik måste proverna vara transparenta och inte fläckiga. Provljuset bör styras så att det centrala ljuset blockeras. Belysningen (tack vare kondensorn) bildar en ihålig kon, med endast snett ljus, som speglar på provet och omgivningen. Bilden är bildad med ljusstrålar spridda av provet och scenen, som fångas av målet.

Det är en lämplig teknik för att observera levande celler och organismer. Detta är så, eftersom kontrasten skapas av en ljus organisme på mörk bakgrund, så vi avslöjar organismernas bakgrunder, kanter och konturer. En av de viktigaste användningarna är i hematologi, på levande blodceller.

Faskontrasttekniken motsvarar också en kontrastobservationsteknik, oavsett redundans. Detta innebär att resultatet av bilden kommer att vara frukten av att ljuset passerar genom provet, normalt levande, och de olika brytningsindex som härrör.

Ljus från en halogen-volframlampa / lampa riktas genom en uppsamlingslins och fokuseras på specialiserade kondensorringar. Vågfronter som passerar genom ringen belyser provet och passerar direkt (eller diffraheras) genom provet och försenas av provets fasgradienter. Det riktade ljuset, diffraherat och samlat av linsen, separeras av en fasplatta och fokuseras på bildplanets mellanplan för att bilda den slutliga bilden.

Denna teknik används för observation av levande celler eller för att studera material med mycket tunna ark.

Fluorescensmikroskopet är baserat på vilket föremålen är upplysta av strålar med en viss våglängd. Den observerade bilden är resultatet av elektromagnetisk strålning som avges av molekyler som har absorberat den primära strålningen och återutgivit ljus med en längre våglängd. Jag menar, de blev upphetsade. För att endast passera önskad sekundär emission måste lämpliga filter placeras under kondensorn och över målet.

Således kan vi bestämma denna observationsteknik som indirekt, eftersom observationen eller resultatet är tack vare reaktionen av vissa molekyler eller celler på en första typ av ljus eller strålning som de har absorberat.

Fluorescensmikroskopi används för att detektera vissa ämnen såsom vitamin A eller fluorokrommärkta ämnen. Det gör det också möjligt att bestämma fördelningen av en enda molekylsort, dess kvantitet och plats inuti cellen. Det är en mycket specifik och utvecklad teknik, men samtidigt allmänt använd i biomolekylär analys.